【摘 要】
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目的 :探讨Ca2+对人牙囊细胞增殖、迁移及成骨分化能力的影响。方法 :分离、培养人牙囊细胞(human dental follicle cells,hDFCs),免疫荧光染色检测hDFCs来源,茜素红S和油红O染
【机 构】
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西南医科大学附属口腔医院正畸科; 西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室; 西南医科大学电生理学教育部重点实验室心血管医学研究所;
【基金项目】
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泸州市-西南医科大学联合项目(2016LZXNYD-T04);泸州市科学技术和人才工作局应用基础研究(2018-JYJ-37);泸州市科技局-西南医科大学附属口腔医院联合项目(0800103009)
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目的 :探讨Ca2+对人牙囊细胞增殖、迁移及成骨分化能力的影响。方法 :分离、培养人牙囊细胞(human dental follicle cells,hDFCs),免疫荧光染色检测hDFCs来源,茜素红S和油红O染色鉴定多向分化能力;设置不同Ca2+浓度,CCK8法检测1、3、5、7 d时hDFCs的增殖能力;Transwell小室检测24 h时hDFCs的迁移能力;茜素红染色半定量分析法检测钙结节形成;反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测成骨分化相关基因RUNT相关转录因子2(runtrelated transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:与对照组相比,3、5、7 d时,3、4、5 mmol/L Ca2+显著促进hDFCs增殖(P<0.05);3、4、5、6 mmol/L Ca2+显著促进hDFCs迁移(P<0.01),高浓度Ca2+对其增殖、迁移无显著影响(P>0.05)。茜素红染色结果表明,Ca2+浓度达4 mmol/L时,可显著促进矿化结节生成(P<0.01),矿化物生成与Ca2+呈浓度依赖性。RT-qPCR结果表明,Ca2+上调成骨分化相关基因RUNX2、OCN的表达(P<0.01)。结论:低浓度Ca2+有利于人牙囊细胞增殖与迁移,而高浓度Ca2+更有利于人牙囊细胞成骨分化。
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