【摘 要】
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目的 探讨组织损伤后凋亡信号怎样促进细胞的死亡进程.方法 在激光照射后猪软骨块置培液中,在不同时间(3、6、9、12、24 h)收集的培液,即实验条件培养液(TCM),从未经激光照射
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目的 探讨组织损伤后凋亡信号怎样促进细胞的死亡进程.方法 在激光照射后猪软骨块置培液中,在不同时间(3、6、9、12、24 h)收集的培液,即实验条件培养液(TCM),从未经激光照射的软骨块培液取得的为对照条件培养液(CCM).软骨块继续培养28 d,用聚焦显微镜评价其受损区的进展.分离的软骨细胞单层放于TCM、CCM或正常培养液(NM)培养,阳性对照组单层细胞经紫外线照射10 min后继续用正常培养液培养,培养24 h后,收集细胞并用荧光标记物染色,经流式细胞仪分析.结果 所有经TCM培养的细胞显现半胱氨酸蛋白水解酶(caspase)-3阳性、CMXRos和一氧化氮信号减少或失去;经CCM或NM培养的细胞显现caspase-3阴性、CMXRos和一氧化氮信号完好;阳性对照组细胞显现Caspase-3和CMXRos均阳性、一氧化氮信号减少或失去,代表处于凋亡早期的细胞.不同TCM浓度(100%、50%、25%、12.5%)和时间(0.5、1、3、9、12 h)对细胞作用后,所有细胞均呈现caspase-3阳性、CMXRos和一氧化氮信号减少或失去.结论 激光照射受损软骨释放凋亡因子,可诱导单层细胞死亡.
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