流行性乙型脑炎prM蛋白剪切位点突变的prM—E蛋白表达细胞系的建立

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wylaaram

【摘要】

：

为建立稳定共表达乙型脑炎病毒（JEV）完整M前体蛋白（prM）和E蛋白的BHK-21细胞系，本研究在prM蛋白furin蛋白酶剪切位点编码基因中引入突变，将突变后的prM基因克隆于质粒中构建重组表

【作者】

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李业南陈振师步志高华荣虹

【机构】

：

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2013年3期

【关键词】

：

流行性乙型脑炎病毒 prM蛋白蛋白剪切细胞系 Japanese encephalitis virus prM protein protein cleav

【基金项目】

：

国家公益性行业（农业）科研专项（201203082）,中央级公益性科研院所基本科研业务费专项（ZGKJ201106）

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为建立稳定共表达乙型脑炎病毒（JEV）完整M前体蛋白（prM）和E蛋白的BHK-21细胞系，本研究在prM蛋白furin蛋白酶剪切位点编码基因中引入突变，将突变后的prM基因克隆于质粒中构建重组表达质粒pCAG-JEV-prM（R89A）E。将重组质粒转染BHK-21细胞，转染48h后细胞用含G418的选择性培养基选择培养，进一步经细胞克隆纯化制备表达剪切位点突变的JEVprM-E蛋白的稳定细胞系。经IFA和westernblot鉴定表明，该细胞系能表达JEVprM与E蛋白，所表达的prM蛋白未发生剪切；

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