CD36在高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡中的作用及机制

来源 :中华肾脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lovecat_fish
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目的 观察高糖对大鼠肾小球系膜细胞CD36抗原表达的影响,探讨其与系膜细胞氧化应激和凋亡的关系.方法 大鼠肾小球系膜细胞分为对照组(5.6 mmol/L葡萄糖培养基),甘露醇组(24.2 mmol/L甘露醇+5.6 mmol/L葡萄糖培养基),高糖组(30 mmol/L葡萄糖MEM培养基)、anti-CD36受体封闭组(anti-CD36+30 mmol/L葡萄糖MEM培养基).采用激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)水平.收集细胞培养上清液,测定丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧尿苷(8-OHDG)及谷胱甘肽过氧化酶(GSH-PX)含量.流式AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡.用RT-PCR和Western印迹法检测肾小球系膜细胞CD36、促凋亡基因Bax、抑凋亡基因Bel-2的mRNA及蛋白的表达.结果 大鼠肾小球系膜细胞表达CD36抗原,高糖培养24 h时CD36蛋白表达水平最高.对照组与甘露醇组的ROS水平、细胞上清液中MDA、8-OHDG、GSH-PX水平、早晚期凋亡率、CD36抗原、Bax及Bel-2的mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(均P> 0.05).与对照组相比,高糖组ROS水平、细胞上清液中MDA、8-OHDG水平、早晚期凋亡率、CD36和Bax的mRNA及蛋白表达水平增高,而细胞上清液中GSH-PX水平、Bcl-2的mRNA及蛋白表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.05).与高糖组相比,anti-CD36受体封闭组CD36的mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),ROS水平、细胞上清液中MDA、8-OHDG水平、早晚期凋亡率、Bax mRNA及蛋白表达减少,而细胞上清液GSH-PX水平、Bcl-2 mRNA及蛋白表达增高,差异有统计学意义(均P<0.05).相关分析证实细胞内ROS水平与细胞凋亡率及CD36、Bax蛋白表达均呈正相关,与Bcl-2蛋白表达呈负相关.结论 肾小球系膜细胞表达CD36抗原,且高糖可以诱导CD36抗原的表达,其表达水平与细胞内氧化应激水平成正相关,CD36抗原参与高糖诱导的肾小球系膜细胞凋亡,机制可能是通过高糖环境中增加细胞内氧化应激水平来介导的。

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