【摘 要】
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目的探讨姜黄素抑制硝普钠(SNP)诱导的大鼠软骨细胞凋亡的机制研究。方法每组取4只SD大鼠关节软骨,细胞进行原代培养,将软骨细胞分成6组,分别为空白对照组(A组),SNP损伤组(B
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81460339)
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目的探讨姜黄素抑制硝普钠(SNP)诱导的大鼠软骨细胞凋亡的机制研究。方法每组取4只SD大鼠关节软骨,细胞进行原代培养,将软骨细胞分成6组,分别为空白对照组(A组),SNP损伤组(B组),SNP+5μmol/L姜黄素组(C组),SNP+10μmol/L姜黄素组(D组),SNP+20μmol/L姜黄素组(E组),SNP+30μmol/L姜黄素组(F组)。用CCK8法检测不同浓度的姜黄素对软骨细胞增殖的影响,同时检测各组中软骨细胞的活性;用RtPCR检测软骨细胞MMP-13、caspase-3、Bax和Bcl-2基因的表达情况;用Hoechst 33342染色观察软骨细胞核凋亡情况;Western Blotting检测线粒体凋亡途径相关蛋白的表达情况。结果①当姜黄素的浓度为20μmol/L时,姜黄素对软骨细胞的促增殖作用最为明显;②CCK8法检测各组细胞的活性率从大至小依次为A组>E组>D组>C组>F组>B组;③RtPCR检测软骨细胞caspase-3、Bax和Bcl-2表达量经姜黄素处理后均有显著变化;④Hoechst 33342染色结果表明姜黄素能改善SNP诱导的软骨细胞核染色质的损伤,减少软骨细胞中的线粒体膜电位;⑤Western boltting检测各组软骨细胞中caspase-3、Bax、蛋白的表达情况,表达量依次为B组>E组>A组;Bcl-2蛋白的表达情况,表达量依次为A组>E组>B组。结论姜黄素通过抑制线粒体凋亡途径,从而减少SNP诱导的大鼠软骨细胞的凋亡。
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