梨咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因PbCCoAOMT1的功能验证

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石细胞团的含量及大小是决定梨果实品质的关键因素之一.目前已知木质素是石细胞主要组成成分,而梨中木质素合成关键酶CCoAOMT的功能目前尚不明晰.为此,克隆PbCCoAOMT1编码区全长(MF346688.1)并构建真核表达载体pCAMBIA 1301 a-PbCCoA OMT1.通过农杆菌介导的浸花法将PbCCoAOMT1转化野生型拟南芥,利用分子检测确定获得阳性过表达PbCCoAOMT1拟南芥株系后,对其纯合T3代株系花序茎进行木质素及次生细胞壁特异性染色.结果 表明,在拟南芥中过表达PbCCoAOMT1可以一定程度上促进次生壁的发育及木质化.运用溴乙酰法测定拟南芥花序茎中木质素含量发现,转基因植株中木质素含量较野生型显著上升,为野生型的1.24倍.进一步说明PbCCoAOMT1在木质素生物合成中具有重要作用.
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