【摘 要】
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采用荧光SYBR GreenⅠ建立小鼠细胞因子mRNA实时定量PCR的检测方法;并利用建立的实时定量PCR的检测方法对感染H5N1禽流感病毒的BALB/c小鼠不同时间采集的肺脏组织中几种重要
【机 构】
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军事医学科学院军事兽医研究所; 吉林农业大学发展学院; 吉林大学畜牧兽医学院; 中国兽医药品监察所;
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划基金资助项目(2005CB523005);国家科技支撑计划基金资助项目(2006BAD06A01)
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采用荧光SYBR GreenⅠ建立小鼠细胞因子mRNA实时定量PCR的检测方法;并利用建立的实时定量PCR的检测方法对感染H5N1禽流感病毒的BALB/c小鼠不同时间采集的肺脏组织中几种重要致炎细胞因子及趋化因子mRNA表达水平进行了检测。对H5N1禽流感病毒感染的BALB/c小鼠肺脏细胞因子的检测具有高度的特异性,检测的灵敏度为101~102拷贝数。H5N1禽流感病毒感染BALB/c小鼠后,小鼠肺脏中IL-1β、IL-6、TNFα、MIG、IP-10、RANTES、MIF和HMGB1细胞因子mRNA表达水平与对照组小鼠相比均有明显差异。建立的实时定量PCR能在基因转录水平敏感和特异地反应细胞因子的表达水平,该技术在基础和临床免疫研究中,具有良好的应用价值。
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