吗啡预处理对大鼠心肌细胞缺氧复氧时miR-133b-5p与Fas表达的影响

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目的

评价吗啡预处理对大鼠心肌细胞缺氧复氧时微小RNA-133b-5p (miR-133b-5p)与Fas表达的影响。

方法

健康成年雄性SD大鼠心室肌细胞,接种于24孔板或60 mm培养皿培养,采用随机数字表法分为3组(n=24):对照组(C组)、缺氧复氧组(H/R组)和吗啡预处理组(MPC组)。C组细胞正常培养,H/R和MPC组细胞缺氧90 min后复氧,MPC组于缺氧前采用含1 μmol/L吗啡的无血清DMEM培养10 min,再换为无吗啡培养液培养30 min。于复氧120 min时采用MTT法测定心肌细胞活力,检测培养液乳酸脱氢酶(LDH)活性,采用Hoechst 33234染色法检测心肌细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率;实时定量PCR法检测miR-133b-5p与Fas mRNA的表达,Western blot法检测Fas蛋白的表达。

结果

与C组比较,H/R组心肌细胞活力降低,培养液LDH活性和细胞凋亡率升高,miR-133b-5p表达下调,Fas mRNA及蛋白表达上调(P<0.05);与H/R组比较,MPC组心肌细胞活力升高,培养液LDH活性和细胞凋亡率降低,miR-133b-5p表达上调,Fas mRNA及蛋白表达下调(P<0.05)。

结论

吗啡预处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的机制与上调miR-133b-5p表达,下调Fas表达有关。

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