【摘 要】
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【目的】构建pEGFP-N1-LC3真核表达载体,并将其转染进人胚肾细胞293T,通过Earle＇s盐平衡液（Balanced salt solution,EBSS）饥饿诱导观察细胞自噬现象。【方法】RT-PCR扩增LC3基因
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81360324,81760500）, 广西自然科学基金项目（2017GXNSFAA198362）, 广西高等教育本科教学改革工程项目（2017JGB130）资助.
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【目的】构建pEGFP-N1-LC3真核表达载体,并将其转染进人胚肾细胞293T,通过Earle＇s盐平衡液（Balanced salt solution,EBSS）饥饿诱导观察细胞自噬现象。【方法】RT-PCR扩增LC3基因,并将其插入pEGFP-N1真核表达载体构建重组质粒。将重组质粒转染至人胚肾细胞293T,显微镜观察、Western blot检测GFP-LC3融合蛋白表达情况。对转染细胞进行Earle＇s盐平衡液饥饿诱导,通过Western blot验证自噬指标,激光共聚焦显微镜观察自噬泡形成。【
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