【摘 要】
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[目的]探讨年龄因素对大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)生物学特性的影响.[方法]分别从青年(3个月龄)和老年(14个月龄)雄性SD大鼠分离培养NPCs.镜下观察两组NPCs形
【机 构】
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南方医科大学第三临床医学院,广州市,510515;海军总医院骨科,北京市,100048
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[目的]探讨年龄因素对大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)生物学特性的影响.[方法]分别从青年(3个月龄)和老年(14个月龄)雄性SD大鼠分离培养NPCs.镜下观察两组NPCs形态特征和生长状况;待细胞传至第3代时,绘制生长曲线评估其增殖能力;衰老相关β半乳糖苷酶(senescence associated-beta-galactosidase,SA-β-gal)染色法测定NPCs衰老情况;流式细胞仪检测细胞周期分布;RT-PCR检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖及SOX-9的mRNA相对表达.[结果]两组细胞均呈短梭形或多角形,老年组NPCs胞体略偏大、扁平,胞质的折光性减弱,核变大;青年组NPCs较老年组贴壁、生长快,达到细胞融合状态所需时间短;生长曲线结果显示,进入对数生长期后,青年组NPCs增殖速率显著高于老年组;SA-β-gal染色结果显示,青年组蓝染的NPCs呈散在分布,而老年组多呈簇状分布,其SA-β-gal阳性率显著高于青年组(P＜0.05);细胞周期分析结果显示,老年组G1期细胞的百分比显著高于青年组(P＜0.05),S期细胞百分比显著低于青年组(P ＜0.05);RT-PCR检测结果显示,青年组Ⅱ型胶原、蛋白多糖及SOX-9的mRNA相对表达量显著高于老年组(P＜0.05).[结论]随年龄增长,NPCs衰老后其生物学活性及表型基因的表达降低.
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