【摘 要】
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目的:评价结核分枝杆菌MPT64(简称M64)和ESAT6(简称E6)DNA疫苗不同剂量联合免疫、与细胞因子联合免疫的保护效力,以及Ag85A(简称85A)和Ag85B(简称85B)DNA疫苗的保护效力.方法
【机 构】
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解放军总医院第二附属医院全军结核病中心,海规生物科技(上海)有限公司
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目的:评价结核分枝杆菌MPT64(简称M64)和ESAT6(简称E6)DNA疫苗不同剂量联合免疫、与细胞因子联合免疫的保护效力,以及Ag85A(简称85A)和Ag85B(简称85B)DNA疫苗的保护效力.方法:将C57BL/6小鼠随机分为14组免疫:①生理盐水;②载体pVAX1 100μg;③卡介苗;④M64 100μg+E6 100μg;⑤M64 50μg+E6 50 μg;⑥M64 75μg+E625μg;⑦M64 25μg+E6 75μg;⑧M64 25μg+E6 25μg;⑨M64 100μg+IFN-γ 100μg;⑩E6 100μg+IFN-γ 100 μg;(11)M64100 μg+IL-12 100μg;(12)E6 100μg+IL-12 100μg;(13)85A100 μg;(14)85B 100μg.用ELISA法检测血清抗体,结核分枝杆菌通过尾静脉攻击小鼠,动态观察小鼠体重变化;攻击4周后,取肺、肝和脾观察病理改变、称重量、做菌落计数.结果:不同剂量的M64和E6 DNA联合免疫、85A和85BDNA分别免疫均能诱导小鼠产生特异性抗体,但M64或E6与IFN-γ或IL-12质粒DNA共同免疫后特异性抗体水平与对照组无显著性差异;各组血清抗体亚型IgG2a均无显著升高,IgG2b均显著高于IgG1.第2、3、4、8、9、11、12组在感染后4周体重明显增加,而第1、14、5、6组体重下降;第3、11、9、7组的肺菌落指数较少.第10、13组肺肉眼未见明显病变;第2～4、7、9～13组肺组织主要为不同程度的增殖性反应,第1、6、8、14组肺组织为增殖性反应与渗出性反应并存,第5组为渗出性反应.结论:DNA免疫的量需100 μg才能诱导产生强的保护效力;M64和E6DNA各100μg混合免疫、85A DNA疫苗的保护效力与卡介苗相当;M64和E6 DNA与IFN-γ或IL-12质粒DNA共同免疫后,明显增强其保护效力.
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