栓菌420漆酶同工酶B基因克隆及异源表达

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根据铜结合区的保守氨基酸序列设计简并引物,扩增栓菌420(Trametes sp.420)基因组。结合长距离反向PCR(LD-IPCR)技术,克隆得到新型漆酶同工酶B基因(lacB),包括结构基因(2255bp)及5’-和3’-非编码序列。lacB含12个内含子,其eDNA序列长1560bp,编码495aa成熟多肽和24aa信号肽。lacB与其它不同来源的真菌漆酶基因具有较高的同源性,而与植物、细菌、昆虫的漆酶基因同源性低于25%。将不合信号序列的lacBeDNA通过质粒pPIC9克隆到表达载体pPIC9
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