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目的
探讨miR-204靶向调控Bcl-2家族的机制及其在年龄相关性白内障发病过程中的作用。
方法临床实验研究。于2014年10~12月在中国医科大学附属第四医院眼科,收集年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜标本36例为实验组,选取新鲜人眼透明晶状体前囊膜标本12例为对照组。利用生物信息学软件,预测miR-204可能调控的Bcl-2家族关键基因;应用Real time q-PCR方法,检测年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜和正常人眼晶状体前囊膜间miR-204及其预测靶基因的表达;利用Lipofectamine 2000瞬时转染miR-204 mimic和inhibitor,分别上调和下调人晶状体上皮细胞中miR-204的表达,利用Real time q-PCR方法验证转染效率,并检测预测靶基因的表达变化。
结果3种不同的生物信息学软件预测到Bcl-2家族中bcl-2、mcl-1可能为miR-204的靶基因。与对照组相比,年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组,miR-204的表达显著升高,bcl-2、mcl-1的表达显著降低。miR-204 mimic转染组,miR-204的表达显著升高,bcl-2、mcl-1的表达显著降低;miR-204 inhibitor转染组,miR-204的表达显著降低,bcl-2、mcl-1的表达显著升高。差异均有统计学意义(P<0.01)。
结论miR-204在年龄相关性白内障晶状体组织中呈高表达,miR-204可能通过靶向调控Bcl-2家族成员bcl-2、mcl-1的表达,在年龄相关性白内障发病过程中发挥重要角色,miR-204可能成为白内障非手术治疗的新靶点。