【摘 要】
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本研究以Gen Bank中蓝藻抗病毒蛋白N（CVN）基因序列（DQ668406.1）为基础,合成CVN基因,构建表达质粒pMAL-c5x-CVN,通过优化诱导条件,表达出可溶性CVN重组蛋白。利用cck8试剂盒检测CV
【机 构】
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华南农业大学兽医学院; 广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室; 石河子大学动物科技学院; 广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室;
【基金项目】
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国家重点研发计划项目(2018YFD0501200);现代农业技术产业体系基金项目(CARS-35);国家自然科学基金项目(31272564);广东省高等学校优秀青年教师培养计划项目(YQ201530)
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本研究以Gen Bank中蓝藻抗病毒蛋白N（CVN）基因序列（DQ668406.1）为基础,合成CVN基因,构建表达质粒pMAL-c5x-CVN,通过优化诱导条件,表达出可溶性CVN重组蛋白。利用cck8试剂盒检测CVN重组蛋白对Marc-145细胞的毒性,并在安全浓度范围内进行了抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）试验。在PRRSV感染Marc-145细胞的吸附、穿入和复制三个阶段进行检测,探究CVN体外抗PRRSV的作用效果。各阶段的病毒TCID50检测、间接免疫荧光试验以及qPCR测定结果表明,CVN在PRRSV感染宿主细胞过程中的入侵阶段发挥阻断作用,而在病毒吸附细胞和在细胞内复制的阶段没有抑制效果。本研究为新型抗PRRSV药物的研发奠定了试验基础。
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