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实时荧光定量PCR是目前基因表达量差异分析的首逸方法之一.虽然其操作简单,但如何保证其定量结果的可信度一直是个难题,特别是针对只有20多个碱基的miRNA的定量分析.本研究以水稻miR408在不同组织中的表达差异为实例,系统地优化和阐述了有关荧光定量的新标准及要求.结果表明,引物的浓度对于荧光定量PCR体系的优化至关重要.