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【摘 要】 探讨系统性红斑狼疮（SLE）合并骨质疏松症（OP）患者血清骨保护素（OPG）检测的临床意义；【方法】采用酶联免疫吸附试验检测50例女性SLE患者（16例合并OP）和30例女性健康志愿者外周血清OPG水平，采用单因素方差分析比较OP组、非OP组、健康志愿组血清OPG水平差异，采用Pearson相关检验分析血清OPG水平与25-OH维生素D3水平的相关性，采用受试者工作特征曲线（ROC）分析血清OPG水平判断SLE合并OP的敏感性和特异性。【结果】 SLE合并OP组血清OPG水平显著高于非OP组及健康志愿组（217.7pg/ml VS 116.0 pg/ml VS 87.1pg/ml，P<0.01）；SLE患者血清OPG水平与25-OH维生素D3水平显著负相关（r= -0.439，P<0.01）；以血清OPG水平120pg/ml作为判断SLE是否合并OP的临界值，诊断敏感性为75.0%，特异性为61.8%。【结论】 OPG与SLE合并OP有关，检测其血清水平对判断SLE是否合并OP可能具有一定的临床价值。
【关键词】 系统性红斑狼疮 骨质疏松症 骨保护素
【中图分类号】 R593.24+1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160（2014）08-0044-02
系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus， SLE）是一种多系统损害的自身免疫性疾病，多见于生育期女性，病情复杂，病程冗长，由于血管炎、狼疮肾炎的存在，免疫炎症因子的反复影响及激素等药物的应用，年轻SLE患者即可出现骨质疏松症（Osteoporosis， OP），它已成为影响SLE 患者生活质量及预后的重要因素[1]。骨保护素（Osteoprotegerin， OPG）是近年新发现的参与骨代谢的重要蛋白分子，国外有文献报道其可能与SLE患者OP的发生有关[2]，而国内相关研究报道较少。近期，我们就OPG与SLE合并OP的关系作了初步研究，现报道如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2011年1月至2014年8月在南京医科大学连云港临床医学院风湿免疫科住院的50例非绝经女性SLE患者为研究对象，均符合美国风湿病学会1997年SLE分类标准[3]。SLE患者分为合并OP组、非合并OP组，以30例非绝经健康女性为对照组。OP诊断符合2008年Lewiecki 等提出的诊断标准[4]。SLE合并OP组平均年龄（34.7±13.9）岁，非合并OP组平均年龄（35.6±12.5）岁，健康对照组平均年龄（35.2±9.7）岁，三组人群年龄无统计学上的显著差异。
1.2 研究方法
50例SLE患者在住院当日采集外周静脉血3ml、30例正常人在我院健康体检时采集外周静脉血3ml，室温静置2小时，待其析出血清后，2000rpm×5min离心上清并收集分装，-200C冰箱冻存。将上述血清同批解冻后，采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清OPG水平，检测步骤按OPG ELISA 试剂盒说明书中所述步骤执行，OPG ELISA 试剂盒购自美国R&D公司。
对所有SLE患者在入院时进行疾病活动指数（SLEDAI）评分，并记录血清25-OH维生素D3水平、免疫球蛋白IgG、IgA、IgM水平、补体C3水平、血沉水平及双能X射线骨密度仪测定的骨密度检测结果。
1.3 统计学方法
采用SPSS18.0统计软件分析，计量资料以均数±标准差（ ）表示，多组计量资料的均数比较采用单因素方差分析，两组计量资料的均数比较采用t检验，两组计量资料的相关分析采用Pearson相关分析，血清OPG水平判断SLE合并OP的敏感性和特异性采用受试者工作特征曲线（ROC）分析，以α=0.05为检验水准，P<0.05认为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 SLE患者与健康对照者血清OPG水平比较
50例SLE患者血清OPG平均水平为（148.5±99.9）pg/ml，其中，16例合并OP组患者血清OPG平均水平为（217.7±134.9）pg/ml，34例非合并OP组患者血清OPG平均水平为（116.0±56.0）pg/ml，30例健康对照组血清OPG平均水平为（87.1±21.6）pg/ml。SLE患者血清OPG平均水平显著高于健康对照组（P<0.01），SLE合并OP组血清OPG平均水平显著高于非合并OP组及健康对照组（P<0.01），SLE非合并OP组OPG平均水平高于健康对照组，但无统计学上的显著差异。见图1。
2.2 血清OPG水平判断SLE患者合并OP的ROC曲线分析
SLE患者血清OPG水平判断SLE合并OP的ROC曲线下面积为0.749，95%可信区间为0.594～0.904（P<0.01，见图2）。图2中ROC曲线拐点对应的血清OPG水平值为120pg/ml，以此水平作为判断SLE是否合并OP的临界值，诊断敏感性为75.0%，特异性为61.8%。
图1 SLE患者与健康志愿者血清OPG水平比較
图2 血清OPG水平判断SLE患者合并OP的ROC曲线分析
2.3 SLE患者血清OPG水平与临床资料的相关分析
SLE患者血清OPG水平与血清25-OH维生素D3水平显著负相关（r= -0.439，P<0.01，见图3），与入院SLEDAI评分、免疫球蛋白IgG、IgA、IgM水平、补体C3水平、血沉水平无明显相关性。
图3 SLE患者血清OPG水平与25-OH维生素D3水平显著负相关
3 讨论
随着风湿免疫专科医师临床队伍的壮大及诊疗水平的提高，大部分SLE患者能得到有效及时治疗，其生存预后已得到明显改善，其3年生存率由1953年的50%提高到2003年的10年生存率92%[5-6]，SLE生存预后的影响因素也不再仅仅取决于肾脏、心脏、颅脑等重要器官的受累程度，SLE的研究领域也随之发生改变。例如，有关SLE骨骼代谢的研究已渐成为新的研究热点[1]。有文献报道，SLE病程中OP的发生比率能高达20%以上[1]。目前，SLE合并OP的诊断主要依靠双能X线检测骨密度，而X线对人体具有一定的放射危害且价格较为昂贵，不适合对SLE患者长期随访反复应用，临床上迫切需要发现检测SLE合并OP的新手段。 维生素D不仅参与骨钙代谢的调节，还参与免疫细胞生长、增殖及凋亡的调控，与SLE病情活动及OP的演变有关[7]。SLE患者需常年避光，体内活性25-OH维生素D3转化减少，加上肾脏受累、糖皮质激素应用等因素的影响，SLE患者体内常存在维生素D相对不足或绝对缺乏。例如，近期法国一项多中心研究报道，170例SLE患者中，81.8%（139/170）的患者出现25-OH维生素D3水平降低[7]，我们的研究样本中占84%（42/50），与国外文献报道接近。在此基础上，我们发现，另一个参与骨代谢的新蛋白分子，骨保护素OPG与25-OH维生素D3在血清中含量呈显著负相关，间接提示OPG可能也参与了SLE患者OP的发生发展。
OPG是核因子κB受体活化因子配体（RANKL）的一种可溶性受体蛋白，主要由成骨细胞表达分泌，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员，有单体和由二硫鍵连接的同源二聚体两种形式。除了成骨细胞以外，OPG还在其它很多组织器官中表达，包括心脏、肾脏、肝脏、脾脏及骨髓等[8]。Park等[9]报道，SLE患者血清OPG水平明显高于正常人，Seguro等[2]报道SLE骨量减少患者血清OPG水平高于骨量正常患者。我们的研究显示，SLE患者血清OPG水平明显高于正常人，并且在SLE合并OP患者中OPG升高更为明显。我们进一步通过ROC曲线分析证实，利用血清OPG水平作为判断SLE是否合并OP的参考指标，具有较好的诊断敏感性和诊断特异性，为临床诊疗SLE是否合并OP提供了新的参考指标，将来在临床上是否具有较好的应用价值需要扩大样本进一步研究证实。
参考文献
[1]Schmajuk G， Yelin E， Chakravarty E， et al. Osteoporosis screening， prevention， and treatment in systemic lupus erythematosus： application of the systemic lupus erythematosus quality indicators. Arthritis Care Res （Hoboken）. 2010，62（7）：993-1001.
[2]Seguro LP， Casella CB， Caparbo VF， et al. Lower P1NP serum levels： a predictive marker of bone loss after 1 year follow-up in premenopausal systemic lupus erythematosus patients. Osteoporos Int. 2014，22 [Epub ahead of print].
[3]Hochberg MC. Updating the American College of Rheumatology revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum，1997，40（9）：1725.
[4]Lewiecki EM， Gordon CM， Baim S， et al. International Society for Clinical Densitometry 2007 Adult and Pediatric Official Positions.Bone. 2008，43（6）：1115-1121.
[5]Jessar RA，Lamont-Havers RW， Ragan C. Natural history of lupus erythematosus disseminatus. Ann Intern Med，1953，38：713-731
[6]Cervera R， Khamashta MA， Font J， et al. Morbidity and mortality in systemic lupus erythematosus during a 10-year period： a comparison of early and late manifestations in a cohort of 1000 patients.Medicine， 2003，82：299-308.
[7]Schoindre Y， Jallouli M， Tanguy ML， et al.Lower vitamin D levels are associated with higher systemic lupus erythematosus activity， but not predictive of disease flare-up.Lupus Sci Med. 2014，7，1（1）：e000027.
[8]Boyce BF， Xing L.Biology of RANK， RANKL， and osteoprotegerin. Arthritis Res Ther. 2007，9 Suppl 1：S1.
[9]Park YJ， Shin YJ， Kim WU， et al. Prediction of subclinical atherosclerosis by serum osteoprotegerin in premenopausal women with systemic lupus erythematous： correlation of osteoprotegerin with monocyte chemotactic protein-1.Lupus. 2014，23（3）：236-244.
通讯作者：丁翔
【关键词】 系统性红斑狼疮 骨质疏松症 骨保护素
【中图分类号】 R593.24+1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160（2014）08-0044-02
系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus， SLE）是一种多系统损害的自身免疫性疾病，多见于生育期女性，病情复杂，病程冗长，由于血管炎、狼疮肾炎的存在，免疫炎症因子的反复影响及激素等药物的应用，年轻SLE患者即可出现骨质疏松症（Osteoporosis， OP），它已成为影响SLE 患者生活质量及预后的重要因素[1]。骨保护素（Osteoprotegerin， OPG）是近年新发现的参与骨代谢的重要蛋白分子，国外有文献报道其可能与SLE患者OP的发生有关[2]，而国内相关研究报道较少。近期，我们就OPG与SLE合并OP的关系作了初步研究，现报道如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2011年1月至2014年8月在南京医科大学连云港临床医学院风湿免疫科住院的50例非绝经女性SLE患者为研究对象，均符合美国风湿病学会1997年SLE分类标准[3]。SLE患者分为合并OP组、非合并OP组，以30例非绝经健康女性为对照组。OP诊断符合2008年Lewiecki 等提出的诊断标准[4]。SLE合并OP组平均年龄（34.7±13.9）岁，非合并OP组平均年龄（35.6±12.5）岁，健康对照组平均年龄（35.2±9.7）岁，三组人群年龄无统计学上的显著差异。
1.2 研究方法
50例SLE患者在住院当日采集外周静脉血3ml、30例正常人在我院健康体检时采集外周静脉血3ml，室温静置2小时，待其析出血清后，2000rpm×5min离心上清并收集分装，-200C冰箱冻存。将上述血清同批解冻后，采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清OPG水平，检测步骤按OPG ELISA 试剂盒说明书中所述步骤执行，OPG ELISA 试剂盒购自美国R&D公司。
对所有SLE患者在入院时进行疾病活动指数（SLEDAI）评分，并记录血清25-OH维生素D3水平、免疫球蛋白IgG、IgA、IgM水平、补体C3水平、血沉水平及双能X射线骨密度仪测定的骨密度检测结果。
1.3 统计学方法
采用SPSS18.0统计软件分析，计量资料以均数±标准差（ ）表示，多组计量资料的均数比较采用单因素方差分析，两组计量资料的均数比较采用t检验，两组计量资料的相关分析采用Pearson相关分析，血清OPG水平判断SLE合并OP的敏感性和特异性采用受试者工作特征曲线（ROC）分析，以α=0.05为检验水准，P<0.05认为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 SLE患者与健康对照者血清OPG水平比较
50例SLE患者血清OPG平均水平为（148.5±99.9）pg/ml，其中，16例合并OP组患者血清OPG平均水平为（217.7±134.9）pg/ml，34例非合并OP组患者血清OPG平均水平为（116.0±56.0）pg/ml，30例健康对照组血清OPG平均水平为（87.1±21.6）pg/ml。SLE患者血清OPG平均水平显著高于健康对照组（P<0.01），SLE合并OP组血清OPG平均水平显著高于非合并OP组及健康对照组（P<0.01），SLE非合并OP组OPG平均水平高于健康对照组，但无统计学上的显著差异。见图1。
2.2 血清OPG水平判断SLE患者合并OP的ROC曲线分析
SLE患者血清OPG水平判断SLE合并OP的ROC曲线下面积为0.749，95%可信区间为0.594～0.904（P<0.01，见图2）。图2中ROC曲线拐点对应的血清OPG水平值为120pg/ml，以此水平作为判断SLE是否合并OP的临界值，诊断敏感性为75.0%，特异性为61.8%。
图1 SLE患者与健康志愿者血清OPG水平比較
图2 血清OPG水平判断SLE患者合并OP的ROC曲线分析
2.3 SLE患者血清OPG水平与临床资料的相关分析
SLE患者血清OPG水平与血清25-OH维生素D3水平显著负相关（r= -0.439，P<0.01，见图3），与入院SLEDAI评分、免疫球蛋白IgG、IgA、IgM水平、补体C3水平、血沉水平无明显相关性。
图3 SLE患者血清OPG水平与25-OH维生素D3水平显著负相关
3 讨论
随着风湿免疫专科医师临床队伍的壮大及诊疗水平的提高，大部分SLE患者能得到有效及时治疗，其生存预后已得到明显改善，其3年生存率由1953年的50%提高到2003年的10年生存率92%[5-6]，SLE生存预后的影响因素也不再仅仅取决于肾脏、心脏、颅脑等重要器官的受累程度，SLE的研究领域也随之发生改变。例如，有关SLE骨骼代谢的研究已渐成为新的研究热点[1]。有文献报道，SLE病程中OP的发生比率能高达20%以上[1]。目前，SLE合并OP的诊断主要依靠双能X线检测骨密度，而X线对人体具有一定的放射危害且价格较为昂贵，不适合对SLE患者长期随访反复应用，临床上迫切需要发现检测SLE合并OP的新手段。 维生素D不仅参与骨钙代谢的调节，还参与免疫细胞生长、增殖及凋亡的调控，与SLE病情活动及OP的演变有关[7]。SLE患者需常年避光，体内活性25-OH维生素D3转化减少，加上肾脏受累、糖皮质激素应用等因素的影响，SLE患者体内常存在维生素D相对不足或绝对缺乏。例如，近期法国一项多中心研究报道，170例SLE患者中，81.8%（139/170）的患者出现25-OH维生素D3水平降低[7]，我们的研究样本中占84%（42/50），与国外文献报道接近。在此基础上，我们发现，另一个参与骨代谢的新蛋白分子，骨保护素OPG与25-OH维生素D3在血清中含量呈显著负相关，间接提示OPG可能也参与了SLE患者OP的发生发展。
OPG是核因子κB受体活化因子配体（RANKL）的一种可溶性受体蛋白，主要由成骨细胞表达分泌，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员，有单体和由二硫鍵连接的同源二聚体两种形式。除了成骨细胞以外，OPG还在其它很多组织器官中表达，包括心脏、肾脏、肝脏、脾脏及骨髓等[8]。Park等[9]报道，SLE患者血清OPG水平明显高于正常人，Seguro等[2]报道SLE骨量减少患者血清OPG水平高于骨量正常患者。我们的研究显示，SLE患者血清OPG水平明显高于正常人，并且在SLE合并OP患者中OPG升高更为明显。我们进一步通过ROC曲线分析证实，利用血清OPG水平作为判断SLE是否合并OP的参考指标，具有较好的诊断敏感性和诊断特异性，为临床诊疗SLE是否合并OP提供了新的参考指标，将来在临床上是否具有较好的应用价值需要扩大样本进一步研究证实。
参考文献
[1]Schmajuk G， Yelin E， Chakravarty E， et al. Osteoporosis screening， prevention， and treatment in systemic lupus erythematosus： application of the systemic lupus erythematosus quality indicators. Arthritis Care Res （Hoboken）. 2010，62（7）：993-1001.
[2]Seguro LP， Casella CB， Caparbo VF， et al. Lower P1NP serum levels： a predictive marker of bone loss after 1 year follow-up in premenopausal systemic lupus erythematosus patients. Osteoporos Int. 2014，22 [Epub ahead of print].
[3]Hochberg MC. Updating the American College of Rheumatology revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum，1997，40（9）：1725.
[4]Lewiecki EM， Gordon CM， Baim S， et al. International Society for Clinical Densitometry 2007 Adult and Pediatric Official Positions.Bone. 2008，43（6）：1115-1121.
[5]Jessar RA，Lamont-Havers RW， Ragan C. Natural history of lupus erythematosus disseminatus. Ann Intern Med，1953，38：713-731
[6]Cervera R， Khamashta MA， Font J， et al. Morbidity and mortality in systemic lupus erythematosus during a 10-year period： a comparison of early and late manifestations in a cohort of 1000 patients.Medicine， 2003，82：299-308.
[7]Schoindre Y， Jallouli M， Tanguy ML， et al.Lower vitamin D levels are associated with higher systemic lupus erythematosus activity， but not predictive of disease flare-up.Lupus Sci Med. 2014，7，1（1）：e000027.
[8]Boyce BF， Xing L.Biology of RANK， RANKL， and osteoprotegerin. Arthritis Res Ther. 2007，9 Suppl 1：S1.
[9]Park YJ， Shin YJ， Kim WU， et al. Prediction of subclinical atherosclerosis by serum osteoprotegerin in premenopausal women with systemic lupus erythematous： correlation of osteoprotegerin with monocyte chemotactic protein-1.Lupus. 2014，23（3）：236-244.
通讯作者：丁翔