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目的 改进大鼠肝星状细胞的分离方法,提高肝星状细胞分离的纯度和活力.方法 SD大鼠在静脉注射1 m1含二氯亚甲基二磷酸盐的脂质体3d后,用含100U/ml肝素的D-H anks液灌注肝脏l0～l5min,改用含0.05%胶原酶溶液的D-Hanks液灌注25～30min,将肝脏细胞悬液置于0.025%胶原酶、0.005%DNase Ⅰ的溶液中振荡消化30 min,细胞悬液过200目筛网,50×g离心2 min去除肝细胞,300×g离心10 min得到肝脏非实质细胞沉淀,将细胞悬浮于Nycodenz使终浓度为11.5%,1400×g离心17mmin,吸取Nycodenz上层的细胞即为肝星状细胞.台盼蓝拒染实验鉴定细胞活力,自发荧光、D esmin免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度,内源性过氧化物酶染色检测库普弗细胞.结果肝星状细胞得率每只大鼠约3×107个,细胞活力在95%以上,初分离的肝星状细胞在328 nm激发光下自发蓝绿色荧光,De smin免疫细胞化学染色鉴定纯度达到90%,未检测到内源性过氧化物酶阳性细胞.结论建立了一种无库普弗细胞混杂的大鼠肝星状细胞分离方法,可以用于原代肝星状细胞的生物学行为的研究。