【摘 要】
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目的 探讨白念珠菌ALS3、SSA1 基因缺失对阴道上皮细胞激发免疫反应的作用.方法 培养白念珠菌野生株及ALS3、SSA1 基因敲除株(SC5314、Δals3、Δssa1),对其进行形态测定.按
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,江苏省皮肤病与性病重点分子生物学实验室,南京 210042中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所,江苏省皮肤病与性病重点分子生物学实验室,南京 210042
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目的 探讨白念珠菌ALS3、SSA1 基因缺失对阴道上皮细胞激发免疫反应的作用.方法 培养白念珠菌野生株及ALS3、SSA1 基因敲除株(SC5314、Δals3、Δssa1),对其进行形态测定.按不同MOI感染人阴道上皮细胞系VK2/E6E7细胞,通过台盼蓝染色观察和乳酸脱氢酶(LDH)活性检测,评价不同MOI白念珠菌对上皮细胞的损伤作用;使用酶联免疫吸附试验(ELISA)评估感染过程中炎性细胞因子及趋化因子在共培养上清中的差异.结果 ALS3 基因的缺失对白念珠菌芽管长度影响差异无统计学意义,而SSA1 基因的缺失与其他两个菌株相比芽管长度减少约30％～40％(P<0.001).台盼蓝染色观察及LDH测定发现,3株菌在感染上皮细胞时,其细胞损伤能力均与菌载量成正比;与野生型相比,Δssa1 突变体在相同比率感染上皮细胞时,细胞损伤能力明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05),Δals3 突变株影响较小,甚至略微升高.检测炎性细胞因子及趋化因子发现,突变株在诱导上皮细胞产生促炎因子及趋化因子(GM-CSF、G-CSF、IL-1α、 IL-8)的能力上明显减弱,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 ALS3 和SSA1 基因表达在阴道上皮细胞抗白念珠菌感染的局部免疫应答过程中可能起到重要作用,且SSA1 基因表达意义更大.
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