【摘 要】
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目的:用基因工程技术构建金属蛋白酶组织抑制剂的克隆质粒.方法:从人乳腺癌细胞中分离提取总RNA.经逆转录PCR(RT-PCR)扩增出金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)的cDNA.插入经NdeI和
【机 构】
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新疆医科大学临床医学院中心实验室包虫病临床研究所,复旦大学医学院病理学教研室
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目的:用基因工程技术构建金属蛋白酶组织抑制剂的克隆质粒.方法:从人乳腺癌细胞中分离提取总RNA.经逆转录PCR(RT-PCR)扩增出金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)的cDNA.插入经NdeI和XhoI双酶切的PET19b载体中,构建了克隆质粒PET19bTIMP-1.结果:对此克隆质粒进行了限制性酶切鉴定和DNA序列分·析,结果在扩增出的cDNA中624个碱基中与发表的TIMP-1 cDNA序列相比,除361位碱基由A变为G外,其余均完全相同.结论:该突变导致编码的氨基酸由苏氨酸变为丙氨酸,
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