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小鼠24p3基因真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yangpingliu

【摘 要】

：

目的构建小鼠24p3基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH3T3细胞中24p3/SIP24蛋白的表达情况,初步鉴定24p3/SIP24蛋白介导铁向细胞内转运的生物学功能.方法RT-PCR自小鼠肺组

【作 者】

：

安江宏 周建新 陈彬 

【机 构】

：

第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室

【出 处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2005年17期

【关键词】

：

24p3/SIP24 稳定转染 小鼠NIH3T3细胞 mouse 24p3 gene  stable transfection  NIH3T3 cell 

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目的构建小鼠24p3基因真核表达载体并观察其稳定转染的NIH3T3细胞中24p3/SIP24蛋白的表达情况,初步鉴定24p3/SIP24蛋白介导铁向细胞内转运的生物学功能.方法RT-PCR自小鼠肺组织中克隆24p3 cDNA.用基因重组技术构建24p3-pcDNA3.0真核表达载体并行酶切和测序鉴定.脂质体DOTAP方法转染NIH3T3细胞,48 h后用G418筛选阳性克隆并培养扩增至21 d.对阳性克隆的培养基上清中24p3/SIP24蛋白的表达用ELISA和Westernblot分析,进一步用原子吸收

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