【摘 要】
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目的构建结核分枝杆菌Rv2994基因原核表达载体并进行表达,为进一步研究奠定基础.方法PCR扩增Rv2994基因编码序列,定向克隆入融合蛋白原核表达载体pGEX-1λT获得重组表达质粒p
【机 构】
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四川大学华西医学中心感染与免疫研究室
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目的构建结核分枝杆菌Rv2994基因原核表达载体并进行表达,为进一步研究奠定基础.方法PCR扩增Rv2994基因编码序列,定向克隆入融合蛋白原核表达载体pGEX-1λT获得重组表达质粒pGEX-2994,转化大肠杆菌测序后诱导表达,纯化目的蛋白并免疫新西兰大白兔获取多价抗体.结果从结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出Rv2994基因,成功构建了融合表达质粒pGEX-Rv2994,转化大肠杆菌JM109后,经IPTG诱导,表达出约73kDa重组融合蛋白,用Western blotting证实其有良好
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