抗人纤维蛋白单克隆抗体SZ-63可变区基因的克隆及其基因工程抗体的研究

来源 :中华血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yzl1983523
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应用氯化铯-超离心法从抗人纤维蛋白单克隆抗体SZ-63杂交瘤细胞抽取总RNA,经Oligo(dT)纤维素柱层析分离出mRNA。采用RT-PCR技术,扩增出了SZ-63重链和轻链可变区基因。应用基因重组技术将SZ-63可变区基因片段与人免疫球蛋白γ1重链CH1和K轻链恒区基因进行拼接,构建噬菌体SZ-63/Hu Fab表达载体,并在大肠杆菌中表达。表达的嵌合抗体Fab片段为可溶性,ELISA及Western blot检测证实能特异地与人纤维蛋白呈结合反应,表达量约为210μg/L。

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