寨卡提取物体外对人结肠癌细胞凋亡的诱导作用及其作用机制研究

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目的研究寨卡提取物诱导人结肠癌LoVo细胞凋亡的作用,并对其可能的作用机制进行探讨。方法以寨卡提取物作用于人结肠癌LoVo细胞,采用MTT法分析寨卡提取物对LoVo肿瘤细胞的抑制生长作用;采用Annexin V-FITC荧光染色实验,考察细胞在药物作用下的质膜变化,对提取物诱导LoVo细胞凋亡进行检测;采用比色法测定寨卡提取物对人大肠癌LoVo肿瘤细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)的耗竭作用和对谷胱甘肽-S转移酶(GST)的诱导作用;同时利用DCFH-DA探针,检测LoVo肿瘤细胞给药后的活性氧水平;应用W estern蛋白印迹法检测Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达。结果寨卡提取物具有明显的体外抗肿瘤活性,并呈剂量依赖关系,IC50为550μg.m l-1。该药物可通过改变细胞质膜,耗竭细胞内谷胱甘肽含量,增加谷胱甘肽-S转移酶含量,上调肿瘤细胞内活性氧水平等途径,提高Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达,诱导LoVo细胞发生凋亡。结论寨卡提取物可诱导LoVo细胞凋亡,其作用机制可能通过耗竭细胞内GSH的含量,以ROS为介导直接作用于细胞线粒体,诱导凋亡的产生。寨卡提取物对LoVo细胞凋亡的诱导作用还可能与其增加Caspase-3和Caspase-9蛋白表达有关。
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