富血小板血浆对脂肪干细胞体外增殖及成脂分化的影响

来源 :温州医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cfj4208
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目的:研究不同体积分数富血小板血浆(PRP)对脂肪干细胞(ASCs)体外增殖及成脂分化的影响。方法:采用酶消化组织块法分离培养ASCs,有限稀释法克隆纯化,检测细胞表面标志物并进行鉴定。改良两步离心法从人全血中制备PRP。利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测在培养基中分别添加不同体积分数(0、10%、20%、30%)PRP对ASCs增殖的影响。反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测在成脂诱导培养基中添加不同体积分数PRP对ASCs成脂分化相关基因过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)、脂蛋白脂肪酶(LPL)、脂肪分化相关蛋白(adipophilin)表达的影响。结果:CCK-8结果显示,培养基中添加PRP显著促进了ASCs的增殖(P<0.01);与10%PRP相比,20%PRP或30%PRP更好地促进了ASCs的增殖(P<0.01),而20%PRP与30%PRP相比,差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR结果显示,成脂诱导培养基中添加PRP时,PPARγ、LPL、adipophilin表达均明显升高(P<0.05),而加入PRP的体积分数为10%、20%、30%时,对PPARγ、adipophilin表达的影响差异无统计学意义(P>0.05),以20%PRP对LPL表达的促进作用最为明显(P<0.01)。结论:PRP可以促进ASCs体外增殖及成脂分化,对脂肪组织再生有重要研究价值。
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