【摘 要】
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用限制酶Pst Ⅰ完全消化毒素源性大肠杆菌H10407的热敏感肠毒素(LT)质粒DNA,酶切片段经电泳分离后,用Southern分子杂交技术定位LT基因。回收5.3kb的LT DNA片段并将它与经Pst
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院基础医学研究所
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用限制酶Pst Ⅰ完全消化毒素源性大肠杆菌H10407的热敏感肠毒素(LT)质粒DNA,酶切片段经电泳分离后,用Southern分子杂交技术定位LT基因。回收5.3kb的LT DNA片段并将它与经Pst Ⅰ完全酶解的pUC8DNA混合,体外连接后用于转化感受态E.coli JM83细胞。筛选后获得了一株能有效表达LT的重组子。免疫学及生物学测定表明,此克隆株所产生的LT与亲本株H10407所产生者具有相同的免疫原性和生物活性,且其产最为亲本株的16倍。
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