人Sef基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ws1984003
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构建人Sef-L和Sef-S基因的复制缺陷型重组腺病毒表达载体,为研究Sef的功能和作用机制以及Sef的基因治疗奠定基础。通过PCR方法以hSef的表达质粒为模板扩增得到hSef的编码序列,亚克隆到穿梭载体pAdTrack-CMV中,经测序验证之后,将穿梭载体使用Pme I酶切线性化,然后与腺病毒基因组质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,得到重组的Ad-hSef-L和Ad-hSef-S质粒,最后将Ad-hSef-L和Ad-hSef-S质粒使用Pac I线性化,转染到HEK293细胞中,包装收
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