以痘苗病毒为辅助病毒生产慢病毒载体的探究

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目的 建立新型、高产量的慢病毒衍生载体的生产体系。方法 构建主框架质粒pVECRNA、包装质粒pGAGPOL及包膜质粒pVSVG。通过脂质体将这三个质粒共转染至BHK2t细胞,再用含有T,RNA聚合酶基因的重组痘苗病毒vTF-3感染细胞,培养4d后,收集培养上清,0.22μm滤膜过滤。结果 将培养上清进行RT—PCR反应,结果能扩增出96bp长度的目的条带,将培养上清感染BHK2t细胞,检测到BHK2t细胞中GFP的表达,测定病毒载体滴度为(1.45±0.30)×10^7tu/ml。结
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