【摘 要】
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目的 研究中国仓鼠卵巢上皮细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO cell)是否表达蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)l亚型.方法 参照GeneBank数据库PKCl亚型的cDNA序列;通过EMB
【机 构】
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董(王乐)瑾,武警广东第一支队,河北医科大学
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目的 研究中国仓鼠卵巢上皮细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO cell)是否表达蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)l亚型.方法 参照GeneBank数据库PKCl亚型的cDNA序列;通过EMBL-EBI数据库的CLUSTALW,选取种属间同源性最高的序列;利用GENERUNNER软件设计PKCl,亚型的特异引物;RT-PCR扩增CHO细胞PKCl亚型的cDNA序列;利用AT克隆技术将PKCl连接到pGEM-T载体上,经蓝白斑筛选,酶切鉴定后测序;Western blotting方法检测CHO细胞中PKCl亚型.结果 RT-PCR和Western blotting技术证实CHO细胞表达PKCl亚型,并经测序证实.结论 CHO细胞中发现PKCl亚型的存在,为深入研究PKCl亚型的结构、功能及与细胞内信号转导通路的关系奠定基础.
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