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【摘要】目的：分析清脑益智方对多发梗塞性痴呆或血管性痴呆的实验效果观察。方法：采用体外细胞培养方法，分析中药对谷氨酸损神经元的作用。结果：清脑益智方对星形胶质细胞的增殖没有影响（3H-TdR），并且能够显著提高谷氨酸损伤后神经元的存活率；提高细胞的存活能力；降低孵育液中LDH的含量【1】。结论：经本实验研究，清脑益智方能够起到对神经元的较好的保护效果。
【关键词】神经元损伤；谷氨酸；清脑益智方；实验研究
【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2014）02-0077-02
清脑益智方在临床中多应用于多发梗塞性痴呆或血管性痴呆患者的治疗当中。此次实验为探讨清脑益智方的作用机理，采用含有中药有效成分的脑脊液，利用神经元谷氨酸损伤模型从神经胶质细胞和神经元互相作用的角度进行离体实验研究。
1 材料与方法
1.1 体外培养【2】
2 结果
2.1 中药对谷氨酸损伤神经元存活的影响
谷氨酸损伤模型组神经元死亡率明显高于空白对照组，再加入中药脑脊液培养液后，神经元死亡率明显下降，而正常脑脊液培养液组未见次变化。
2.2 中药对谷氨酸损伤神经元培养液中乳酸脱氢酶含量的影响
谷氨酸损伤模型组培养液中LDH含量明显高于空白对照组，在加入中药脑脊液培养液后，LDH含量较模型组明显下降。
2.3 中药对星形胶质细胞增殖的影响
正常脑脊液和中药脑脊液对星形胶质细胞的增殖均无影响，但正常血清和中药血清均出现对星形胶质细胞的增殖抑制作用。如表1；2.4 中药对星形胶质细胞增殖的影响正常脑脊液和中药脑脊液对星形胶质细胞的增殖均无影响，但是正常血清和中药血清均出现对星形胶质细胞的增殖抑制作用。如表2；
表1 各组OD值比较
3 讨论
胶质细胞构成中枢神经元生存的微环境，对神经元的发育、生长以及损伤后再生发挥重要作用。在一些体外实验中已被证明，星形胶质细胞可被某些因素诱导而分泌神经营养因子。本实验结果表明，中药清脑益智方通过星形胶质细胞间接地对谷氨酸损伤神经元起到保护作用，推论可能是由于中药清脑益智方刺激星形胶质细胞分泌神经营养因子所致。清脑益智方主要针对中风后脑内瘀热化毒、毒损脑络所设，对于兴奋性氨基酸引起的神经兴奋毒性，并非直接针对病因治疗，而是对于兴奋毒性造成的神经元这样一种结果间接的发挥其整合调节作用。
作为一种药理实验方法和手段，中药血清药理为我们拓展了思路，但它对于血脑障碍以内的细胞是否也同样适用？目前报道仍较少。本实验研究结果发现，无论是空白血清还是中药血清均没有出现明显的治疗作用，遵循血清药理学的思路，我们采用脑脊液来开展研究，结果显示此种方法可以克服血清药理学的某些局限，姑且称这种方法为“中药脑脊液药理学”。
参考文献：
[1]梅建勋，张伯礼，陆融. 清脑益智方对谷氨酸损伤神经元保护作用的体外实验观察[J]中药新药与临床药理，2001.12（04）：252-255
[1]Aleksandra PG，Donald B，EtsuroU.The inhibitory ef-fects of amyloid on glutamate and glucose by cultured astrocytes[J].Brain Res，1977，754：65-71.
[1]Sreit WJ.The role of microglia in brain injury[J]. Neuro-toxicology，
1996，17（3-4）：671-678.
【关键词】神经元损伤；谷氨酸；清脑益智方；实验研究
【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2014）02-0077-02
清脑益智方在临床中多应用于多发梗塞性痴呆或血管性痴呆患者的治疗当中。此次实验为探讨清脑益智方的作用机理，采用含有中药有效成分的脑脊液，利用神经元谷氨酸损伤模型从神经胶质细胞和神经元互相作用的角度进行离体实验研究。
1 材料与方法
1.1 体外培养【2】
2 结果
2.1 中药对谷氨酸损伤神经元存活的影响
谷氨酸损伤模型组神经元死亡率明显高于空白对照组，再加入中药脑脊液培养液后，神经元死亡率明显下降，而正常脑脊液培养液组未见次变化。
2.2 中药对谷氨酸损伤神经元培养液中乳酸脱氢酶含量的影响
谷氨酸损伤模型组培养液中LDH含量明显高于空白对照组，在加入中药脑脊液培养液后，LDH含量较模型组明显下降。
2.3 中药对星形胶质细胞增殖的影响
正常脑脊液和中药脑脊液对星形胶质细胞的增殖均无影响，但正常血清和中药血清均出现对星形胶质细胞的增殖抑制作用。如表1；2.4 中药对星形胶质细胞增殖的影响正常脑脊液和中药脑脊液对星形胶质细胞的增殖均无影响，但是正常血清和中药血清均出现对星形胶质细胞的增殖抑制作用。如表2；
表1 各组OD值比较
3 讨论
胶质细胞构成中枢神经元生存的微环境，对神经元的发育、生长以及损伤后再生发挥重要作用。在一些体外实验中已被证明，星形胶质细胞可被某些因素诱导而分泌神经营养因子。本实验结果表明，中药清脑益智方通过星形胶质细胞间接地对谷氨酸损伤神经元起到保护作用，推论可能是由于中药清脑益智方刺激星形胶质细胞分泌神经营养因子所致。清脑益智方主要针对中风后脑内瘀热化毒、毒损脑络所设，对于兴奋性氨基酸引起的神经兴奋毒性，并非直接针对病因治疗，而是对于兴奋毒性造成的神经元这样一种结果间接的发挥其整合调节作用。
作为一种药理实验方法和手段，中药血清药理为我们拓展了思路，但它对于血脑障碍以内的细胞是否也同样适用？目前报道仍较少。本实验研究结果发现，无论是空白血清还是中药血清均没有出现明显的治疗作用，遵循血清药理学的思路，我们采用脑脊液来开展研究，结果显示此种方法可以克服血清药理学的某些局限，姑且称这种方法为“中药脑脊液药理学”。
参考文献：
[1]梅建勋，张伯礼，陆融. 清脑益智方对谷氨酸损伤神经元保护作用的体外实验观察[J]中药新药与临床药理，2001.12（04）：252-255
[1]Aleksandra PG，Donald B，EtsuroU.The inhibitory ef-fects of amyloid on glutamate and glucose by cultured astrocytes[J].Brain Res，1977，754：65-71.
[1]Sreit WJ.The role of microglia in brain injury[J]. Neuro-toxicology，
1996，17（3-4）：671-678.