【摘 要】
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目的:构建酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channels 3,ASIC3)干扰慢病毒质粒并进行效率鉴定.方法:利用GenBank获取ASIC3基因序列并合成相应干扰序列,通过T4DNA连接酶将ASI
【机 构】
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江苏大学医学院,江苏大学附属医院麻醉科
【基金项目】
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镇江社会发展科技支撑项目(SH2014078).
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目的:构建酸敏感离子通道3(acid-sensing ion channels 3,ASIC3)干扰慢病毒质粒并进行效率鉴定.方法:利用GenBank获取ASIC3基因序列并合成相应干扰序列,通过T4DNA连接酶将ASIC3基因片段连接至环状Plko.1-Puro载体,将重组质粒转染293T细胞获取慢病毒,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测病毒滴度;将包装之后的慢病毒感染PC12、BV2、N2a细胞,分别分为ASIC3-shRNA组和EGFP-shRNA组(阴性对照),经慢病毒感染后用qRT-PC
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