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随着现代科学技术的发展，传统的依靠分离细菌来鉴定病原微生物的方法，已远远不能满足对现代各种病原微生物的诊断以及流行病学研究的需要。人们希望对病原体的检验方法能够更加快速、准确无误，且检测通量更高，人为影响因素尽可能减少。而通常的PCR检测方法和实时荧光定量PCR方法虽然可达到快速、高通量的目的，但却无法获得分子诊断的黄金标准-基因序列，从而可能造成假阳性的结果。而利用常规的Sanger测序法仅在对大片段DNA进行序列测定时才显示出优势，且速度慢、成本高、通量低。但在实际工作中，如果引物对选择得好，很短的一