辛二酰苯胺异羟肟酸抑制慢性髓系白血病细胞增殖的研究

来源 :中国临床药理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qiuyujie
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目的研究辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)通过对microRNAs的调控及抑制慢性髓系白血病K562细胞的增殖和诱导细胞凋亡的作用。方法对照组细胞不作任何处理;低、中、高3个浓度实验组分别给予0.625,1.25和5μmol·L-1的SAHA处理。用噻唑蓝(MTT)法测定细胞活力,计算半抑制浓度(IC50);用Western blot法检测聚ADP核糖聚合酶(PARP)水平,用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测Bcr-Abl基因转录水平。将筛选到的可能靶向Bcr-Abl的microRNA转染到K562细胞中,用MTT法和定量PCR分别检测K562细胞的活力和Bcr-Abl基因的转录水平。结果结果显示,低、中、高浓度实验组对K562细胞增殖抑制率分别为42.4%,56.3%和89.1%,IC50为1.24μmol·L-1;荧光定量PCR结果显示,高浓度实验组处理24和36 h后,Bcr-Abl的转录水平分别下调为69.7%和29.3%。Western blot结果显示,SAHA诱导K562细胞PARP蛋白发生特异性切割,说明SAHA诱导细胞发生凋亡;同时SAHA上调可能靶向于Bcr-Abl的2个microRNAs(miR-5195和miR-194)水平;向K562细胞转染miR-5195和miR-194能显著下调Bcr-Abl转录水平,并抑制K562细胞的增殖。结论 SAHA通过上调miR-5195和miR-194的表达水平,进一步下调Bcr-Abl的转录水平,进而抑制K562细胞增殖并诱导细胞凋亡。
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