胸膜肺炎放线杆菌4型菌毛亚单位基因apfA特异性片段的克隆和表达

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tangyujia

【摘要】

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以猪胸膜肺炎放线杆菌血清型7型国内分离株25-4株基因组DNA为模板，PCR扩增其apfA特异性基因片段，PCR产物经纯化后与载体pMD18-T进行连接、转化，经酶切及序列分析鉴定后，亚克隆至

【作者】

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郭洋刘思国王春来张秀华彭永刚宫强杜绍范

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,沈阳农业大学畜牧兽医学院

【出处】

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中国兽医学报

【发表日期】

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2006年5期

【关键词】

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猪胸膜肺炎放线杆菌菌毛 apfA 克隆表达 Actinobacillus pleuropneumoniae fimbriae apfA clon

【基金项目】

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黑龙江省博士后启动基金资助项目

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以猪胸膜肺炎放线杆菌血清型7型国内分离株25-4株基因组DNA为模板，PCR扩增其apfA特异性基因片段，PCR产物经纯化后与载体pMD18-T进行连接、转化，经酶切及序列分析鉴定后，亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中，构建重组表达质粒pGEX-apfA，转化到感受态大肠杆菌DE3中，以IPTG进行诱导，进行SDS-PAGE电泳。结果表明，25-4株apfA基因与基因库中标准7型apfA基因的同源性达到98％，所表达的融合蛋白相对分子质量约为42000，与预测值相符。apfA特异性基因片段的成功克隆

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