人源抗幽门螺杆菌黏附素HpaA噬菌体单链抗体库的构建和筛选

来源 :现代检验医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sanhaijin123

【摘要】

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目的构建人源噬菌体单链抗体库，筛选抗幽门螺杆菌（Hp）黏附素HpaA特异性抗体.方法首先检测献血员抗Hp和rHpaA抗体，分离阳性者外周血淋巴细胞，提取总RNA并等量混合.利用RT—PCR扩增

【作者】

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王缚鲲安黎云王宪灵贾克然时兰春李玮

【机构】

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白求恩国际和平医院检验科,白求恩军医学院生化教研室

【出处】

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现代检验医学杂志

【发表日期】

：

2009年2期

【关键词】

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噬菌体抗体库单链抗体幽门螺杆菌黏附素 phage display antibody library single-chain Fv Helicoba

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目的构建人源噬菌体单链抗体库，筛选抗幽门螺杆菌（Hp）黏附素HpaA特异性抗体.方法首先检测献血员抗Hp和rHpaA抗体，分离阳性者外周血淋巴细胞，提取总RNA并等量混合.利用RT—PCR扩增全套重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因，采用overlap方法连接，插入噬菌体载体pComb3x构建噬菌体单链抗体库，以纯化rHpaA为靶标筛选特异性抗体.结果成功获得VH和VL基因，分子量分别约为400bp和350bp.将VH和VL纯化后采用overlap方法连接，插入噬菌体载体pComb3x构建成库容量为

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