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目的
寻找广州管圆线虫Ⅴ期幼虫可溶性蛋白中具免疫反应性的抗原。
方法采用双向电泳结合免疫印迹技术,并将得到的蛋白点进行质谱分析,获得具免疫原性的肽段信息,合成肽段免疫小鼠并进一步观察其体外免疫结合性能。
结果Ⅴ期雌雄虫可见的印迹反应点数目分别为8个和4个,此12个点相对应的凝胶点pH值集中于5~7,相对分子质量范围为24 000~40 000。质谱鉴定分析肌动蛋白和半乳糖凝集素为Ⅴ期雌雄虫的共同抗原。进一步对半乳糖凝集素进行抗原表位预测,获得16肽(NH2–KNGDIALHFNPRFDEK)表位,Western印迹验证16肽的小鼠免疫血清能识别广州管圆线虫Ⅴ期幼虫32 000的抗原表位。
结论半乳糖凝集素和肌动蛋白为Ⅴ期雌雄虫具有免疫反应性的共同抗原,半乳糖凝集素16肽抗原表位可作为靶标用于免疫诊断技术的开发和免疫调节机制的研究。