靶向大鼠Nogo受体基因的小发夹RNA慢病毒载体的构建及病毒包装

来源 :山西医药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xuzhidanxu

【摘要】

：

目的构建靶向大鼠Nogo受体（NgR）的小发夹RNA（shRNA）慢病毒载体并进行病毒颗粒包装及滴度测定。方法设计合成3对针对大鼠NgR及1对非特异性的寡核苷酸单链,退火后得到shNgR双链,克

【作者】

：

刘欣春朱悦

【机构】

：

中国医科大学附属第一医院

【出处】

：

山西医药杂志

【发表日期】

：

2012年11期

【关键词】

：

RNA干扰慢病毒属 NOGO受体 RNA interference Lentivirus NgR

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目的构建靶向大鼠Nogo受体（NgR）的小发夹RNA（shRNA）慢病毒载体并进行病毒颗粒包装及滴度测定。方法设计合成3对针对大鼠NgR及1对非特异性的寡核苷酸单链,退火后得到shNgR双链,克隆入慢病毒载体pGC-LV,行聚合酶链反应（PCR）并测序鉴定重组体;构建NgR过表达载体,双酶切并测序鉴定插入序列正确性;NgR过表达载体和各慢病毒shRNA干扰载体共转染293T细胞后,定量反转录（RT）-PCR及蛋白印迹法筛选有效的慢病毒shRNA干扰载体;重组NgR慢病毒shRNA干扰载体和病毒包装质粒共转

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