【摘 要】
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目的建立癌胚抗原(CEA)时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)法。方法采用两株CEA单克隆抗体(CEAMcAb),一株用于固相包被(4.00μg/mL),另一株用于标记铕(Eu3+)制备Eu3+-CEA McAb(1∶1
【机 构】
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中山大学肿瘤防治中心检验科,华南肿瘤学国家重点实验室; 广州市丰华生物工程有限公司; 中山大学附属第一医院黄埔院区检验科;
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目的建立癌胚抗原(CEA)时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)法。方法采用两株CEA单克隆抗体(CEAMcAb),一株用于固相包被(4.00μg/mL),另一株用于标记铕(Eu3+)制备Eu3+-CEA McAb(1∶1600),固相双抗体夹心二步分析法检测人血清中的CEA,并对此方法进行方法学评价。结果本方法与甲胎蛋白(AFP)和糖类抗原19-9(CA19-9)的交叉反应率分别为0.25%和3.58%,而与其他常用肿瘤标志物无交叉反应;低、中、高浓度的CEA质控批内实验变异系数分别为4.75%,4.25%和2.89%,批间实验变异系数分别为9.55%,7.38%和3.69%;平均回收率为95.94%;试剂盒37℃烘烤7d后检测性能基本稳定;并与CEA化学发光免疫分析技术(CLIA)比对试验结果相关系数达0.9986;CEA-TrFIA法检测系统的检测低限(LLD)、生物检测限(BLD)和功能灵敏度(FS)分别为0.4315ng/mL、1.000ng/mL和1.000ng/mL;线性范围为1.000～500.0ng/mL。结论CEA-TrFIA法具有灵敏度高、特异性强、精密性好、线性范围宽、试剂有效期长和非放射性等优点,具有良好的临床应用价值。
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