农杆菌介导一个内源HMG-box转录因子fvhom1转化金针菇

来源 :基因组学与应用生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chen_gm
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利用本实验室金针菇(Flammulina velutipes)基因组、转录组数据对一个内源HMG-box转录因子fvhom1进行了基因结构和表达量分析。通过根癌农杆菌介导转化的方法,以金针菇菌丝球为受体材料转入含该内源HMG-box转录因子的过表达载体,并获得了一个稳定的转化子。该转化子的潮霉素抗性筛选及潮霉素磷酸转移酶基因的PCR扩增结果均证明该过表达载体已整合到金针菇的基因组中。在无选择压力的的PDA固体培养基上继代培养培养5次后仍检测到潮霉素磷酸转移酶基因的存在,表明转入的质粒片段在转基因金针菇中稳定遗传。对该转化子菌丝生长速度测定结果表明,突变体的菌丝生长速度比野生型金针菇菌株显著变慢。实时荧光定量PCR结果表明,突变体中该转录因子表达量与野生型金针菇菌株相比显著上调了100倍左右。该转化子的获得为下一步深入研究金针菇HMG-box转录因子的功能提供了数据支持。
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