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目的
观察维生素D(VitD)对内皮细胞一氧化氮(NO)生成的影响，以及诱导NO释放的可能信号途径。
方法人脐静脉内皮细胞(HUVEC)与不同浓度VitD(0 mmol/L、0.01 mmol/L、0.10 mmol/L、1.00 mmol/L、10.00 mmol/L)一起培养60 min；与1.00 mmol/L VitD分别培养不同的时间(30 min、60 min、90 min、120 min)；加入VitD受体(VDR)激动剂(ZK191784)或拮抗剂(ZK159222)培养60 min。NO荧光探针检测试剂盒(DAF-FM DA)检测细胞培养上清液NO水平。HUVEC和VitD一起培养，加入VDR受体激动剂或拮抗剂分别培养60 min，Western blot测定小窝蛋白(Caveolin-1)和内皮型NO合酶(eNOS)蛋白的表达及磷酸化水平。
结果VitD浓度依赖性增加内皮细胞NO的生成，在浓度为1.0 mmol/L作用60 min产生最大效应。VDR激动剂或拮抗剂预处理内皮细胞可增加或抑制VitD诱导NO生成。VitD和VDR激动剂保持Caveolin-1在正常的低磷酸化水平，增加eNOS的磷酸化水平，而VDR拮抗剂增加Caveolin-1磷酸化，降低eNOS的磷酸化水平。
结论VitD能通过VDR明显诱导内皮细胞NO生成。VitD与VDR相互作用维持Caveolin-1的低磷酸化水平，导致eNOS激活，NO生成增加。