dspp-LacZ转基因小鼠G0代的制备和鉴定

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目的:构建小鼠牙本质涎磷蛋白(DSPP)特异性启动子启动LacZ表达的转基因小鼠G0代.方法:用PCR方法获得DSPP编码序列上游约1.6kb的启动子序列,测序确认后,通过亚克隆方法将其与LacZ编码序列连接到同一个质粒中,构建转基因载体pTN-DPM-LacZ;将线性化的载体DNA注射到小鼠受精卵的雄原核,移植到假孕母鼠的输卵管;仔鼠出生后4周,用PCR检测阳性小鼠.结果:注射的受精卵共503个,移卵后产仔89只,阳性12只,阳性鼠分别传代开始建系.结论:通过显微注射方法获得12只G0代dspp-Lac
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