大鼠视觉发育关键期视网膜相干光断层成像变化与Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达的相关性研究

来源 :中华眼科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong501
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目的 了解SD大鼠视觉发育关键期内视网膜厚度的变化,探讨细胞凋亡的相关作用.方法 实验研究.选择新生SD大鼠50只,其中10只(20只眼)于生后14、18、21、24及42 d行双眼眼底相干光断层扫描(OCT),测量视网膜厚度.另10只大鼠(20只眼)分别于生后14、18、21、24及42 d各取2只大鼠(4只眼),提取视网膜组织总RNA,实时荧光定量PCR法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达水平.另20只大鼠(40只眼)于各对应时间点取4只(8只眼),制作眼球石蜡切片行HE染色并行视网膜厚度测量.同时取10只大鼠(20只眼)于各对应时间点取2只(4只眼)制作冰冻切片行TUNEL染色.对不同时间点的视网膜厚度,Bcl-2、Bax及Caspase-3的mRNA相对表达量进行方差分析,对两种方法所测视网膜厚度进行线性回归分析.结果 大鼠生后14、18、21、24及42 d视网膜厚度OCT测量值分别为(243.42±13.83)、(218.78±8.21)、(195.42±8.02)、(195.74±14.85)及(190.79±11.70)μm,差异有统计学意义(F=15.425,P=0.000).在大鼠生后3周内,视网膜厚度逐渐变薄,此后变化不显著.其结果与HE切片视网膜厚度测量呈线性相关(R=0.794,P=0.000).比较不同时间点大鼠视网膜组织Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA相对表达量,差异均有统计学意义(F=18.684,F=47.307,F:49.611;P=0.000).Bax和Caspase-3 mRNA表达呈增加趋势,并在生后24 d呈现峰值,生后42 d表达量明显下降.TUNEL染色结果显示生后18 d至42 d视网膜神经节细胞层、内核层和外核层均可见较多凋亡细胞,生后42 d视网膜细胞凋亡明显减少.结论 视觉发育关键期内大鼠视网膜厚度逐渐变薄.Cirrus HD-OCT可较准确测量大鼠视网膜厚度,是观察视网膜形态学变化的有效检查方法之一.视觉发育关键期内,细胞凋亡参与大鼠视网膜发育,可能影响视网膜厚度的变化.
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