RNA干扰沉默E-钙黏蛋白表达对人喉癌Hep-2细胞侵袭功能的影响

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目的

探讨沉默E-钙黏蛋白(cadherin)基因表达后对人喉癌Hep-2细胞增殖、迁移能力的影响,为喉癌的基因治疗提供理论依据。

方法

根据Genbank数据库中E-cadherin基因序列,设计、合成3条特异性短发卡RNA(shRNA);脂质体法将shRNA转染入人喉癌Hep-2细胞;利用实时荧光定量PCR检测shRNA转染Hep-2细胞后对E-cadherin基因的沉默效果;四甲基偶氮唑盐法检测转染后Hep-2细胞体外增殖能力的变化,并计算细胞增殖率(生存率);用Transwell实验检测转染后Hep-2细胞体外的迁移能力的变化。

结果

shRNA转染后,干扰组的E-cadherin基因表达比对照组低;干扰组Hep-2细胞的增殖能力较对照组强;Transwell实验中3个干扰组的穿膜细胞数均明显高于阴性对照组,差异均有统计学意义[(262±15)、(288±12)、(292±6)比(74±8)个,均P<0.01]。

结论

RNA干扰沉默E-cadherin基因表达后能使Hep-2细胞的增殖、迁移能力明显增强。有望成为喉癌基因治疗的新靶点。

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