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选择互补且各具优势的2株米曲霉A98和A33为出发菌株,研究了其原生质体制备和电融合条件。接种YPD液体培养基,30%摇瓶培养11h获得菌丝。以0.6mol/L甘露醇为渗透压稳定剂,最佳破壁酶液为溶壁酶:蜗牛酶:纤维素酶=1:1:1,浓度为10mg/mL,28℃酶解2.5h时原生质体浓度达到10s个/mL,再生率≥20%;最佳电融合条件为1MHz交流频率,交流场强300V/cm,直流场强6kV/cm,脉冲间隔60μs,脉冲个数3:在此条件下,电融合率达N10^-5。对获得的融合子进行酱油发酵筛选,以原料收