绿盲蝽膜结合型海藻糖酶AL Tre-2基因表达、纯化及酶学特性

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以绿盲蝽为材料,在前期获得绿盲蝽膜结合型海藻糖酶(ALTre-2)基因的基础上,构建了ALm-2原核表达载体(pET28a-ALTre-2),经IPTG诱导表达、变性、复性和蛋白纯化后,获得具海藻糖酶活力的重组蛋白,最后在以海藻糖为底物及重组蛋白浓度为1.1mg·mL^-1的条件下,对纯化得到的重组ALTre-2蛋白进行活性检测.确定了其酶促反应的最佳pH和最适温度。试验结果表明:ALTre-2基因在大肠杆菌BL21(DE3)中能够高效表达一个约60kD大小的蛋白,SDS-PAGE显示该蛋白以包
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