【摘 要】
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人工合成表皮生长因子受体干扰序列（epithelial growth factor receptor interference,EGFRi）,应用重叠延伸PCR（Overlapping PCR）技术将其与白细胞介素-24（IL-24）连接,并在其间引入一段柔软短肽（Gly4Ser3）。进行序列分析后,将融合基因EGFRi-IL-24重组到表达质粒pPIC9k中,Sal I酶切线性化重组质粒EGFR
【机 构】
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天津科技大学生物工程学院天津市工业微生物重点实验室
【基金项目】
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天津科技大学自然科学基金资助项目（20060206）；
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人工合成表皮生长因子受体干扰序列（epithelial growth factor receptor interference,EGFRi）,应用重叠延伸PCR（Overlapping PCR）技术将其与白细胞介素-24（IL-24）连接,并在其间引入一段柔软短肽（Gly4Ser3）。进行序列分析后,将融合基因EGFRi-IL-24重组到表达质粒pPIC9k中,Sal I酶切线性化重组质粒EGFRi-IL-24/pPIC9k,电击转化毕赤酵母GS115,经G418抗性和PCR筛选得到阳性重组菌株。重组菌株用甲醇进行诱导表达后,通过SDS-PAGE和MTT法分析鉴定蛋白表达产物。结果证实EGFRi-IL-24在毕赤酵母中获得了分泌性表达的活性蛋白,为进一步研究其生物学功能及临床应用奠定了基础。
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