间充质干细胞对原发免疫性血小板减少症患者T细胞分泌细胞因子及调节性T细胞水平影响的体外研究

来源 :中华血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ebear2009
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目的 体外观察骨髓间充质干细胞(MSC)对原发免疫性血小板减少症(ITP)患者CD4+CD25-T细胞比例以及T细胞分泌IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10功能的影响.方法 采用Ficoll分离骨髓单个核细胞,体外培养扩增MSC;采用Ficoll分离法和尼龙棉柱法获取正常人及ITP患者外周血T细胞,应用流式细胞术(FCM)检测T细胞中CD4+CD25T细胞比例;MSC经丝裂霉素(MMC)处理后分别以1×104、5× 104、2×105/孔接种于培养板,然后分别接种体外分离纯化的异体ITP患者及正常人T细胞,共培养5d后用FCM检测CD4CD25+T细胞比例,用ELISA法测定培养上清中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10含量.结果 2×105/孔 MSC与ITP患者T细胞共培养5d后,CD4CD25+T细胞、CD4+CD257CD4+细胞均高于未加MSC的ITP患者T细胞[(4.56±0.70)%对(2.24+0.81)%,(9.91±1.18)%对(4.08±1.17)%],差异均有统计学意义(P<0.05);与未加MSC的ITP患者T细胞组比较,培养上清中IL-2、IFN-γ浓度减低[(97.21±12.07)pg/ml对(280.47+ 17.33)pg/ml,(72.75+7.81)pg/ml对(129.33±16.34)pg/ml],IL-4、IL-10浓度升高[(37.98±4.05)pg/ml对(16.34±2.60)pg/ml,(113.77±5.68)pg/ml对(54.78±5.62)pg/ml].结论 MSC在体外可抑制ITP患者Th1细胞分泌IL-2、IFN-γ,促进Th2细胞分泌IL-4、IL-10,上调CD4+CD25+T细胞比例,进而诱导ITP患者免疫耐受形成。

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