【摘 要】
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针对松萎蔫病的早期诊断及生物防治,本文利用PCR技术从荧光假单胞菌GcM5—1A的基因组中克隆了鞭毛蛋白编码基因fliC,再将该基因克隆到表达载体pET-15b的NcoI和XhoI位点,构建重组
【机 构】
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青岛大学生物系,青岛奥克生物开发有限公司,华中农业大学动物医学院
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针对松萎蔫病的早期诊断及生物防治,本文利用PCR技术从荧光假单胞菌GcM5—1A的基因组中克隆了鞭毛蛋白编码基因fliC,再将该基因克隆到表达载体pET-15b的NcoI和XhoI位点,构建重组质粒pET-15b—fliC,再将重组质粒导人大肠杆菌BL21(DE3),构建工程菌,IPTG诱导工程菌高效表达C-末端具有多聚组氨酸标签的重组鞭毛蛋白,重组蛋白主要以包涵体的形式存在,包涵体经8mol/L尿素溶解,复性并经Ni绀螯合柱亲和层析得到了电泳纯的重组鞭毛蛋白。生测结果表明,重组鞭毛蛋白可引起黑松细胞的大
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