3-酮基嘌呤还原酶(TSC10)基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达

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【摘要】

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TSC10基因所编码的3-酮基嘌呤还原酶是酵母中神经酰胺合成的重要因子。设计了一种从酵母中提取神经酰胺经济、便捷、高效的方法:①利用构建含有TSC10基因的毕赤酵母GS115表达

【作者】

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郑丽娜刘美辰王思明白雪媛赵雨赵大庆王佳雯

【机构】

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长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心

【出处】

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科学技术与工程

【发表日期】

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2018年10期

【关键词】

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3-酮基嘌呤还原酶毕赤酵母基因表达 3-ketopurine reductase Pichia pastoris gene expression

【基金项目】

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吉林省中药组学工程实验室建设项目(2014N155)资助

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TSC10基因所编码的3-酮基嘌呤还原酶是酵母中神经酰胺合成的重要因子。设计了一种从酵母中提取神经酰胺经济、便捷、高效的方法:①利用构建含有TSC10基因的毕赤酵母GS115表达载体pPIC3.5K-TSC10;②电转化法将该表达质粒转化到GS115感受态细胞中;③用G418筛选以及PCR鉴定;④使用qRT-PCR和SDS-PAGE进行检测。结果经过G418筛选以及PCR鉴定后确定获得了包含TSC10基因的毕赤酵母转化子,经过qRT-PCR和SDS-PAGE进行检测后发现TSC10基因在20个阳性菌株中均

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