应用毕赤酵母系统表达人Fascin蛋白

来源 :癌变．畸变．突变 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sam008

【摘要】

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背景与目的：应用酵母表达系统表达人的重要肿瘤分子标志物fascin蛋白。材料与方法：利用分子克隆技术将fascin基因完整编码区克隆至毕赤酵母（Pichia pastoris）分泌表达载体pPIC9中

【作者】

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李德玲李恩民谢剑君吴炳礼张丕显许丽艳

【机构】

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汕头大学医学院肿瘤病理研究室,汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室

【出处】

：

癌变．畸变．突变

【发表日期】

：

2008年6期

【关键词】

：

FASCIN蛋白毕赤酵母分泌表达 pPIC9载体 fascin protein Pichia pastoris secreted expression

【基金项目】

：

国家高新技术研究发展计划（2006AA02A403）,国家自然科学基金资助项目（30672376,30772485）,广东省自然科学基金重点项目（5104541,7118419）

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背景与目的：应用酵母表达系统表达人的重要肿瘤分子标志物fascin蛋白。材料与方法：利用分子克隆技术将fascin基因完整编码区克隆至毕赤酵母（Pichia pastoris）分泌表达载体pPIC9中，获得重组质粒pPIC9-fascin；以限制性内切酶Mss I进行线性化并转化毕赤酵母GS115菌株，用PCR方法筛选出阳性整合克隆；对阳性克隆进行0．5％甲醇诱导表达重组蛋白，银染及Western blot检测培养上清中fascin重组蛋白的表达情况。结果：毕赤酵母能够分泌表达约69kD的fascin重组

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