【摘 要】
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目的 分析R-848对儿童支气管哮喘急性发作期外周血中白细胞介素33(interleukin 33,IL-33)、IL-6和免疫球蛋白 E(immunoglobin E,IgE)的水平及瞬时受体电位香草酸亚型 1(transient receptor potential vanilloid 1,TR-PV1)表达水平的影响及临床意义.方法 收集2019-01/2020-08月,在作者医院接受治疗的急性发作期哮喘患者84例,临床缓解期患者30例,分离培养急性发作期患儿外周血单个核细胞(peripheral
【机 构】
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450003河南郑州,河南省儿童医院东区呼吸科;郑州市第一人民医院药剂科
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目的 分析R-848对儿童支气管哮喘急性发作期外周血中白细胞介素33(interleukin 33,IL-33)、IL-6和免疫球蛋白 E(immunoglobin E,IgE)的水平及瞬时受体电位香草酸亚型 1(transient receptor potential vanilloid 1,TR-PV1)表达水平的影响及临床意义.方法 收集2019-01/2020-08月,在作者医院接受治疗的急性发作期哮喘患者84例,临床缓解期患者30例,分离培养急性发作期患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC).酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和实时荧光逆转录定量聚合酶链反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分别检测患儿外周血中 IL-33、IL-6和 IgE水平以及 TR-PV1 mRNA的相对表达水平.Pearson检测IL-33、IL-6和IgE与TRPV1 mRNA的相关性.ELISA和RT-qPCR实验分别检测不同浓度R-848(0、5、10、20、40 mg/L)刺激PBMC 48h后IL-33、IL-6、IgE与TRPV1 mRNA的相对表达水平.ELISA 和 RT-qPCR 实验分别检测 R-848 20 mg/L 刺激 PBMC 细胞24、48、72、96 h 后 IL-33、IL-6、IgE 水平和 TRPV1 mRNA相对表达水平的变化.结果 急性发作期哮喘患者外周血中IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA水平高于临床缓解期患者(t=20.700、10.205、32.526、9.652,P 均＜0.001);急性发作期外周血中 IL-33、IL-6和 IgE 与 TRPV1 mRNA 呈正相关(r=0.805、0.880、0.805,PP 均＜0.001).不同浓度 R-848刺激 PBMC 细胞48 h 后,R-848 5 mg/L 时,IL-33、IL-6、IgE 和TRPV1 mRNA的水平低于 R-848 0 mg/L(t=8.407、4.592、9.434、4.273,P=0.000、0.009、0.000、0.013),R-848 10 mg/L时,IL-33、IL-6、IgE 和 TRPV1 mRNA 的水平低于 R-848 5 mg/L(t=7.415、5.021、3.547、3.402,P=0.000、0.000、0.037、0.041),R-848 20 mg/L 时,IL-33、IL-6、IgE 和 TRPV1 mRNA 的水平低于 R-848 10 mg/L(t=12.474、9.503、19.981、8.452,P 均=0.000),R-848 20 mg/L 时,IL-33、IL-6、IgE 和 TRPV1 mRNA 的水平与 R-848 40 mg/L 相比无统计学差异(P＞0.05),R-848(0～20 mg/L)处理PBMC细胞48 h后可呈剂量依赖性抑制IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA的水平.R-84820 mg/L作用于 PBMC 48 h 后 IL-33、IL-6、IgE 和 TRPV1 mRNA水平低于 R-848 20 mg/L 作用于 PBMC 24 h(t=21.407、12.574、19.035、5.392,P 均=0.000),R-848 20 mg/L 作用于 PBMC 72 h 后 IL-33、IL-6、IgE 和 TRPV1 mRNA 水平低于R-848 20 mg/L作用于 PBMC 48 h(t=3.754、3.543、7.043、3.412,P=0.031、0.039、0.000、0.044),R-848 20 mg/L作用于PBMC 96 h后IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA水平低于R-848 20 mg/L作用于PBMC 72 h相比无统计学差异(P＞0.05),R-848 20 mg/L处理PBMC细胞24～72 h内可呈时间依赖性抑制IL-33、IL-6、IgE和TRPV1 mRNA的水平.结论R-848 20 mg/L作用于PBMC 72 h可显著抑制急性发作期患者外周血中PBMC分泌IL-33、IL-6、IgE的水平和TRPV1的表达,发挥一定的抗炎作用,有望应用于儿童支气管哮喘的治疗中.
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